Лаборатория химии белков и пептидов

Статьи:

Monastyrnaya, M.M. Zykova T.A., Shwets T.V., Apalikova O.V., Kozlovskaya E.P. Biologically active polypeptides from the tropical sea anemone Radianthus macrodactylus. Toxicon. 2002, 40: 1197-1217.

Клышко Е.В., Ильина А.П., Монастырная М.М., Бурцева Ю.В., Костина Е.Е., Зыкова Т.А., Мензорова Н.И., Козловская Э.П. Биологически активные полипептиды и гидролитические ферменты в актиниях Японского и Охотского морей. Биол. моря. 2002 (в печати).

Монастырная М.М., Зыкова Т.А., Козловская Э.П. Выделение и характеристика высокомолекулярных цитолизинов морской актинии Radianthus macrodactylus. Биоорган. химия. 1999, 25: 733-741.

Зыкова Т.А., Монастырная М.М., Апаликова О.В., Швец Т.В., Козловская Э.П.. Низкомолекулярные цитолизины и ингибиторы трипсина из морской актинии Radianthus macrodactylus. Выделение и частичная характеристика. Биоорган. химия. 1998, 24: 509-516.

Zhadan G.G., Kuznetsova S.M., Opalikova O.V., Monastyrnaya M.M., Emelyanenko V.I., Villar E., Shnirov V.L. Stability of a low molecular mass cytotoxin from the sea anemone Radianthus macrodactylus and membrane-toxin interactions. Biochem. Molecular Biol. Intl. 1994, 32: 331-340

Романенко Л.А., Зелепуга Е.А., Козловская Э.П., Михайлов В.В. Тирозиназная активность меланогенезных бактерий рода Alteromonas. Биол. моря. 1994, 20: 260-263.

Shnyrov V.L., Monastyrnaya M.M., Zhadan G.G., Кusnetsova S.M., Kozlovskaya E.P. Сalorimetric study of interaction of toxin from sea anemone Radianthus macrodactylus with erythrocyte membrane. Biochemistry International. 1992, 26: 219-229.

Mahnir V.M., Kozlovskaya E.P. Isolation of palytoxin from the sea anemone Radianthus macrodactylus. Toxicon. 1992, 30: 1449-1456.

Mahnir V.M., Kozlovskaya E.P. Structure-toxicity relationships of neurotoxin RTX-III from the sea anemone Radianthus macrodactylus. Modification of amino groups. Toxicon. 1991, 29: 819-896.

Чантурия А.Н., Шатурский О.Я., Лишко В.К., Монастырная М.М., Козловская Э.П Взаимодействие токсина морской актинии Radianthus macrodactylus с бислойными фосфолипидными мембранами. Биол. мембраны. 1990, 7: 763-769.

Odinokov S.E., Nabiullin A.A., Kozlovskaya E.P., Elyakov G.B. Structure-function relationship of polypeptide toxins: gating mechanism of sodium channel. Pure Appl. Chem. 1989, 61: 497-500.

Зыкова Т.А., Козловская Э.П. Дисульфидные связи в нейротоксине III из актинии Radianthus macrodactylus. Биоорган. химия. 1989, 15: 904-907.

Брежестовский П.Д., Монастырная М.М., Козловская Э.П., Еляков Г.Б. Действие гемолизина из морской актинии Radianthus macrodactylus на мембрану эритроцитов. Докл. АН CCCР. 1988. 299: 748-750.

Зыкова Т.А., Козловская Э.П., Еляков Г.Б. Аминокислотная последовательность нейротоксинов IV и V из актинии Radianthus macrodactylus. Биоорган. химия. 1988. Т 14. № 11. С. 1489-1494.

Монастырная М.М., Козловская Э.П., Иванов А.С., Мольнар А.А., Халилов Э.М., Еляков Г.Б. Действие метридиолизина из морской актинии Metridium senile на биологические и модельные мембраны //Биол. мембраны. 1988. Т 5. № 8. С. 830-835.

Иванов А.С., Мольнар А.А., Козловская Э.П., Монастырная М.М. Действие токсина из Radianthus macrodactylus на проницаемость биологических и модельных мембран. Биол. мембраны. 1987, 4: 243-248.

Зыкова Т.А., Винокуров Л.М., Маркова Л.Ф., Козловская Э.П., Еляков Г.Б. Аминокислотная последовательность трипсинового ингибитора IV из Radianthus macrodactylus. Биоорган. химия. 1985, 11: 293-301.

Сорокина З.А., Чижмаков И.В, Козловская Э.П., Вожжова Е.И., Еляков Г.Б. Положительная кооперативность связывания тетродотоксина натриевыми каналами нейронов спинальных ганглиев крыс, индуцируемая анемонотоксином RTX-III. Докл. АН СССР. 1985, 282: 433-436.

Козловская Э.П., Иванов А.С., Мольнар А.А., Григорьев П.А., Монастырная М.М., Халилов Э.М., Еляков Г.Б. Ионные каналы в мембранах, индуцированных гемолизином из актинии Radianthus macrodactylus. Докл. АН CCCР. 1984, 277: 748-750.

Руднев В.С., Лихацкая Г.Н., Козловская Э.П., Монастырная М.М., Еляков Г.Б. Влияние гемолизина из морской актинии Radianthus macrodactylus на проницаемость липидных мембран. Биол. мембраны. 1984, 1: 1019-1024.

Сорокина З.А., Чижмаков И.В., Еляков Г.Б., Козловская Э.П., Вожжова Е.И. Исследование механизма инактивации быстрых натриевых каналов с помощью нейротоксина из актинии Radianthus macrodactylus и различных химических реагентов. Физиол. журнал. 1984, 30: 571-579.

Nabiullin A.A., Odinokov S.E., Kozlovskaya E.P., Elyakov G.B. Secondary structure of sea anemone toxins. Curcular dichroism, infrared spectroscopy and Chou-Fasman calculations. FEBS Lett. 1982, 141: 124-127.

Основные научные направления:

Структура и функция биологических макромолекул (белки).

Использование микроорганизмов в биотехнологии.

Основные результаты:

Из нескольких видов актиний выделено и охарактеризовано 28 индивидуальных соединений. Разработано несколько оригинальных схем выделения и очистки полипептидов, подтвержденных авторскими свидетельствами.

Установлена аминокислотная последовательность шести полипептидов из Radianthus macrodactylus: - пяти нейротоксинов и одного ингибитора протеиназ. Показано, что все нейротоксины относятся к новому структурному классу "коротких" анемонотоксинов (47-50 аминокислотных остатков). Методами ИК-, ЯМР- и УФ-спектроскопии определены элементы пространственной структуры. Установлено, что взаимодействие токсина с натриевым каналом является, с одной стороны, электростатическим, а с другой - многоточечным. С помощью метода фиксации потенциала исследовано действие Radianthus анемонотоксинов на функцию натриевых каналов электровозбудимых мембран.

Из актинии R. macrodactylus выделены три высокомолекулярных сфингомиелин-ингибируемых цитолизина (20 кДа) и два низкомолекулярных цитолизина (5 и 6 кДа), а из актинии M. senile -высокомолекулярный (80 кДа) холестерин-ингибируемый цитолизин. Изучены некоторые физико-химические характеристики, липидная специфичность цитолизинов. Установлена частичная последовательность N-концевого фрагмента Radianthus цитолизина RTX-Ala.

С использованием двух независимых методов: точечной фиксации потенциала на изолированном фрагменте эритроцита кролика, и метода дифференциальной сканирующей микрокалориметрии теней эритроцитов человека доказан общий для модельных и биологических мембран механизм литического действия цитолизинов актиний И связывание цитолизинов с белками цитоскелета эритроцитов . Установлено, что специфическое связывание цитолизина со сфингомиелином происходит за счет образования неполярных гидрофобных связей и приводит к последующему формированию в липидном матриксе пор диаметром около 6-10 A. Разработан новый способ количественного определения сфингомиелина в биологических жидкостях, основанный на специфическом взаимодействии этого липида с цитолизинами актиний.

Из водных экстрактов актинии R. macrodactylus выделены три высокомолекулярных (14 кДа) и четыре низкомолекулярных (6 кДа) ингибитора протеиназ, а также палитоксин, ранее обнаруженный только в зоонтариях, что косвенно подтверждает гипотезу о его синтезе симбионтными микроорганизмами.

Из актиний Oulactis (Anthopleura) orientalis в высокоочищенном состоянии выделено три высокомолекулярных ингибитора протеиназ (14 кДа) и два высокомолекулярных цитолизина (20 кДа), аналогичных Radianthus цитолизинам, а из актинии Cribrinopsis similis выделены высоко- и низкомолекулярные цитолизины.

Определена тирозиназная активность ряда морских меланогенных микроорганизмов, симбионтных с морскими асцидиями, губками и двустворчатыми моллюсками. Из бактерий рода Pseudoalteromonas, синтезирующих меланоидные пигменты, выделены два фермента с различным уровнем удельной активности. Обнаружен штамм, продуцирующий L-ДОФА.

Научное сотрудничество

Установление структуры токсинов проведено в сотрудничестве со специалистами Института белка РАН (Пущино-на-Оке), ИБХ КАН (Ташкент), ИБХ РАН им. М.М.Шемякина и Ю.А. Овчинникова (Москва).

Изучение механизма действия нейро- и цитолизинов осуществлено совместно со специалистами Научно-исследовательского института физико-химической медицины МЗ РСФСР (Москва), Института экспериментальной кардиологии Всесоюзного кардиологического научного центра АМН СССР (Москва), Института биохимии им. А.В. Палладина АН УССР (Киев) и Института физиологии АН УССР (Киев).